WondaSil C18色譜柱操作說明

1.色譜柱信息

  WodnaSil C18液相色譜柱是在高純度球狀硅膠基質上鍵合十八烷基的反相分離模式色譜柱，適合用于弱極性至中等極性例如合成藥物、中藥、多肽、有機酸等的分離。WodnaSil C18液相色譜柱從硅膠基質的合成，到化學處理和裝填后的性能檢測，都是在本公司嚴格的產品控制下進行，因此不同批次的柱與柱之間具有優異的重現性;通過獨有的裝填技術填裝的WodnaSil C18柱柱床密度均一穩定，從而確保色譜柱具有高柱效，硅膠粒徑分布均勻，確保柱壓極低。

  WodnaSil C18液相色譜柱具有優異的選擇性，保留能力較強，端基封尾徹底，即使是酸性、堿性或者金屬配位性化合物分析，也能保持良好的峰型。

  WodnaSil C18柱含碳量較低，可以使用100%純水相或者純的緩沖鹽水溶液。

  為了能長期保持WodnaSil C18液相色譜柱的優越性能和正確的使用色譜柱，在使用色譜柱之前請仔細閱讀本說明書。

2.使用前的檢查與須知事項

●檢查包裝箱的外觀有無異常。

●打開包裝，檢查色譜柱的填料名稱、尺寸規格、連接型式是否相符。

●色譜柱中封存流動相為乙腈/水或者甲醇/水的混合物，具體比例請參考柱效報告。

3.色譜柱填料規格

4.色譜柱安裝與操作

  色譜柱在運輸過程中，兩端用堵頭密封。當將色譜柱接入色譜儀器系統時，首先請確保系統中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶，請采用一種能夠與系統及色譜柱都能互溶的溶劑對系統進行充分過渡之后再將色譜柱連接到系統中，并注意流動相的方向要與柱.上標記的方向保持一致。我公司提供的常規液相色譜柱標準接頭形式為1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖)。

色譜柱連接好之后，請確認無漏液現象之后再進行后續操作。

  新的WodnaSil C18柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中，在儲存和運輸過程中，硅膠填料可能會干涸，推薦用純的甲醇或乙腈沖洗10~20倍柱體積對色譜柱進行活化，流速從0. 1mL/min緩慢上升到最佳流速。(如果在活化過程中即發現壓力和基線不正常時，請及時聯系我公司工程師及時處理。)然后再用不含緩沖鹽的流動相進行平衡20倍柱體積，再用

流動相平衡，待壓力和基線穩定之后，再進樣分析。

5.樣品與流動相

  為避免色譜柱堵塞，所有樣品及溶劑，包括緩沖溶液在內，在使用前必須用0.45μm或者0.22uμm的濾膜過濾。

6.色譜柱的保養

●pH WodnaSil C18色譜柱可在pH2~7.5范圍內使用，為保持色譜柱良好的壽命，請避免較強的酸或堿性樣品或者流動相進入色譜柱。

●耐壓 常規色譜柱耐受壓力為20MPa，但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長時間在高壓下運行會對色譜柱造成難以修復的損害，因此系統壓力升高之后，建議盡快排查系統，如果是色譜柱壓力升高，請及時采用適當溶劑沖洗色譜柱。

●溫度 最高操作溫度為60℃，長時間在高溫下操作會顯著降低色譜柱壽命。

●沖洗1. 新柱平衡:新柱是保存在高比例的有機溶劑中，建議先采用色譜柱保存流動相平衡色譜柱一段時間，觀察基線和壓力是否正常，然后再通入流動相。

  如果流動相中不使用緩沖鹽或離子對試劑，直接用流動相平衡即可;如果流動相使用緩沖鹽，先要用高比例的水相充分過渡20倍柱體積，然后進行流動相平衡。

2.使用完畢后的清洗、保存及再使用時流動相的過渡:

①使用完畢后，先用高比例的水相進行沖洗約20倍柱體積。

②如果流動相中不使用緩沖鹽或離子對試劑，上述①完畢后，用100%的有機溶劑沖洗約20倍柱體積，然后此條件下進行保存，再使用時直接沖流動相即可。

③如果流動相中使用緩沖鹽或離子對試劑，上述①完畢后，用100%的有機溶劑沖洗約20倍柱體積，然后此條件下進行保存，再使用時請務必用高比例的水相充分過渡20倍柱體積，再通入流動相。

●儲存色譜 柱長期不用，建議日常沖洗方法完成之后，再用純乙腈或者甲醇沖洗20倍柱體積，然后保存在該流動相條件下，之后卸掉色譜柱，兩端用堵頭密封，并放在溫度變化小的場所。